(Saliva DNA Extraction Kit (50 Reactions

کیت استخراج ستونی DNA از بزاق با کد KPG-DNASa، محصولی تخصصی و کارآمد از شرکت کارمانیا پارس ژن است که برای تخلیص DNA با خلوص بالا از نمونه‌های بزاق طراحی شده است. این کیت با بهره‌گیری از فناوری ستون‌های سیلیکا با جذب بالا (High absorbance column)، روشی سریع، غیرتهاجمی، آسان و قابل اعتماد برای استخراج DNA ژنومی از سلول‌های اپیتلیال موجود در بزاق فراهم می‌آورد که برای کاربردهای گسترده در آزمایش‌های ژنتیکی، تشخیص بیماری‌ها، مطالعات جمعیت‌شناسی، پزشکی قانونی، غربالگری نوزادان و تحقیقات مولکولی ایده‌آل است.
مزایا و کاربردهای کلیدی کیت KPG-DNASa:
– نمونه‌گیری غیرتهاجمی و آسان: جمع‌آوری نمونه بزاق، روشی بدون درد، ساده و مناسب برای تمام گروه‌های سنی (از جمله نوزادان و کودکان) است.
– بدون نیاز به هموژنیزاسیون برای بزاق: برای نمونه بزاق، نیازی به هموژنیزاسیون نبوده و نمونه به طور مستقیم استفاده می‌شود.
– سازگاری با نمونه‌های متنوع: علاوه بر بزاق، این کیت قابلیت استخراج DNA از نمونه‌های خون، سرم، پلاسما، محیط انتقالی بدون سلول (VTM)، کشت سلول، باکتری گرم منفی و بافت هموژنزه را نیز دارد.
– فناوری ستونی سیلیکا با جذب بالا: ستون‌های با کیفیت، قابلیت اتصال بالای DNA و خلوص مطلوب را فراهم می‌آورند.
– کیفیت و خلوص استثنایی: DNA استخراج شده، عاری از پروتئین و سایر آلاینده‌ها بوده و نسبت جذب A260/A280 ایده‌آلی برای آزمایش‌های حساس مولکولی مانند PCR و Real-Time PCR دارد.
– طراحی ایرانی، کیفیت جهانی: تولید شده توسط یک شرکت دانش‌بنیان ایرانی با استانداردهای بین‌المللی.
نمونه‌های قابل استفاده با حجم مناسب:
– بزاق: ۲۰۰ میکرولیتر (مستقیماً استفاده می‌شود، نیازی به هموژنیزاسیون نیست)
– خون/پلاسما/VTM: ۲۰۰ میکرولیتر
– کشت سلول: ۱۰⁷ × ۱ سلول
– بافت هموژنزه: ۳۰ تا ۵۰ میلی‌گرم در ۴۰۰ میکرولیتر بافر هموژنیز کننده (هموژن شده) و سپس ۱۵۰ میکرولیتر از نمونه هموژنزه با ۵۰۰ میکرولیتر بافر لیز A مخلوط شده و پس از ۵ دقیقه انکوباسیون (حداکثر ۵ دقیقه) استفاده شود.
– باکتری گرم منفی: ۲۰۰ میکرولیتر از سوسپانسیون نیم مک‌فارلند
نمای کلی فرآیند استخراج:
فرآیند استخراج با این کیت در مراحل اصلی زیر خلاصه می‌شود:
مرحله ۱ – آماده‌سازی و لیز:
۳۵۰ میکرولیتر از بافر لیز B را به یک میکروتیوب عاری از DNase/RNase اضافه کنید. مقدار مناسب از نمونه (به طور مثال ۲۰۰ میکرولیتر از بزاق) را اضافه کرده و به مدت ۱۰ ثانیه به شدت ورتکس کنید. سپس به مدت ۲۰ دقیقه در دمای ۵۵ درجه سانتی‌گراد انکوبه کنید (هر ۱۰ دقیقه یکبار نمونه‌ها را ورتکس کنید).
مرحله ۲ – ادامه لیز:
۵۰ میکرولیتر از بافر لیز C را به میکروتیوب اضافه کرده و به مدت ۵ ثانیه به شدت مخلوط کنید.
مرحله ۳ – رسوب‌دهی:
۲۵۰ میکرولیتر از بافر رسوب‌دهنده سرد (که از قبل در فریزر سرد شده است) را به میکروتیوب اضافه کرده و به آرامی با دست مخلوط کنید. (توجه: می‌توانید بافر لیز C و بافر رسوب‌دهنده را با هم مخلوط کرده و سپس به میکروتیوب اضافه کنید.)
مرحله ۴ – عبور از ستون و اتصال:
۷۵۰ میکرولیتر از محتویات میکروتیوب را به ستون استخراج DNA اضافه کرده و با دور ۱۲۰۰۰ RPM به مدت ۱ دقیقه و ۳۰ ثانیه سانتریفیوژ کنید. (توجه: طبق روش کیت، مقادیر بسیار مناسبی از DNA جداسازی می‌شود و نباید حجم اضافی نمونه را به ستون اضافه کنید.)
مرحله ۵ – شستشوی اول:
ستون را به لوله جمع‌آوری جدید منتقل کرده، ۵۳۰ میکرولیتر از بافر شستشو I اضافه کرده و با دور ۸۰۰۰ RPM به مدت ۱ دقیقه سانتریفیوژ کنید.
مرحله ۶ – شستشوی دوم:
ستون را به لوله جمع‌آوری جدید منتقل کرده، ۵۳۰ میکرولیتر از بافر شستشو II اضافه کرده و با دور ۸۰۰۰ RPM به مدت ۱ دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع جمع شده را دور بریزید.
مرحله ۷ – خشک‌کردن کامل:
محتویات لوله جمع‌آوری را خالی کرده و ستون را مجدداً با دور ۱۰۰۰۰ RPM به مدت ۱ دقیقه سانتریفیوژ کنید تا بافر شستشوی باقیمانده کاملاً خارج شود.
مرحله ۸ – آلوشن (Elution) و جمع‌آوری:
ستون را به یک میکروتیوب ۱.۵ میلی‌لیتری استریل و عاری از DNase منتقل کرده و ۵۰ میکرولیتر آب مقطر عاری از RNase/DNase (ترجیحاً با دمای ۵۵ درجه سانتی‌گراد) اضافه کنید. به مدت ۱ دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید. سپس با دور ۱۰۰۰۰ RPM به مدت ۱ دقیقه سانتریفیوژ کنید.
مرحله ۹ – افزایش بازدهی (اختیاری):
برای افزایش میزان DNA استخراج شده، پیشنهاد می‌شود نمونه DNA استخراج شده را مجدداً بر روی ستون منتقل کرده و با دور ۱۰۰۰۰ RPM به مدت ۱ دقیقه سانتریفیوژ کنید.
مرحله ۱۰ – ذخیره‌سازی:
نمونه DNA استخراج شده را بلافاصله استفاده کنید و در غیر این صورت در دمای ۲۰- درجه سانتی‌گراد برای استفاده بعدی ذخیره کنید.

> راهنمای کامل مرحله‌به‌مرحله استخراج به همراه جزئیات فنی در دفترچه راهنمای محصول (که در کیت موجود است) ارائه شده است.
نکات کلیدی برای بهینه‌سازی استخراج:
– سرد بودن بافر رسوب‌دهنده: حتماً قبل از شروع کار، بافر رسوب‌دهنده را در فریزر قرار دهید تا سرد شود.
– دمای آب آلوشن: استفاده از آب مقطر با دمای ۵۵ درجه سانتی‌گراد به جای دمای اتاق، راندمان جداسازی DNA از ستون را افزایش می‌دهد.
– رعایت زمان انکوباسیون برای بافت: در صورت استفاده از نمونه بافت، زمان انکوباسیون با بافر لیز A نباید از ۵ دقیقه بیشتر شود.
– ورکس کردن در طی انکوباسیون: در زمان انکوباسیون با بافر لیز B، نمونه را هر ۱۰ دقیقه یکبار ورتکس کنید تا عملکرد کیت بهبود یابد.
– عدم افزودن حجم اضافی به ستون: طبق روش کیت، مقادیر بسیار مناسبی از DNA جداسازی می‌شود و نباید حجم اضافی نمونه را به ستون اضافه کنید.
اطلاعات ایمنی:
محلول‌های موجود در این کیت دارای خواص اسیدی و اکسیدانی هستند. از تماس مستقیم با پوست و چشم خودداری کنید. در صورت تماس، محل را با آب فراوان شستشو داده و به نزدیکترین مرکز درمانی مراجعه کنید.
سایر محصولات استخراج DNA و RNA شرکت کارمانیا پارس ژن:
این شرکت تولیدکننده انواع کیت‌های استخراج DNA و RNA به سه روش ستونی، رسوبی و نانوذرات مغناطیسی (مگنت) می‌باشد:
کیت‌های استخراج DNA (به هر سه روش ستونی، رسوبی و مگنت):
– کیت استخراج DNA از خون و بافت
– کیت استخراج DNA از باکتری گرم مثبت و منفی
– کیت استخراج DNA از مایکوباکتریوم
– کیت استخراج DNA از قارچ
– کیت استخراج DNA از ویروس
– کیت استخراج DNA از ویروس HPV
– کیت تخلیص پلاسمید
کیت‌های استخراج RNA (به دو روش ستونی و رسوبی):
– کیت استخراج RNA از خون و بافت
– کیت استخراج RNA از باکتری گرم مثبت و منفی
– کیت استخراج RNA از مایکوباکتریوم
– کیت استخراج RNA از قارچ
– کیت استخراج RNA از ویروس
اطلاعات تماس:
تولیدکننده: کارمانیا پارس ژن
آدرس کارخانه: رفسنجان، ۲۰ کیلومتر جاده رفسنجان به کرمان، منطقه ویژه اقتصادی، ناحیه غذا و دارو
تلفن: ۰۹۱۳۲۹۲۶۱۱۳ | ۰۹۱۳۵۰۲۵۹۸۳
ایمیل: Karmaniaparsgene@gmail.com
کلمات کلیدی: کیت استخراج DNA از بزاق، کیت استخراج DNA از نمونه بزاقی، کیت تشخیص ژنتیکی غیرتهاجمی، کیت غربالگری نوزادان، کیت تست ژنتیک خانگی، کیت استخراج DNA از سلول‌های اپیتلیال، تجهیزات آزمایشگاهی تشخیص مولکولی، کیت ایرانی استخراج DNA از بزاق، Saliva DNA Extraction Kit