Peroxiredoxins Assay Kit

کیت اندازه‌گیری فعالیت پراکسیردوکسین‌ها (PRX) محصول شرکت کارمانیا پارس ژن، یک کیت تخصصی و دقیق برای سنجش فعالیت آنزیم‌های پراکسیردوکسین در انواع نمونه‌های بیولوژیکی است. پراکسیردوکسین‌ها خانواده‌ای از پروتئین‌های آنتی‌اکسیدانی هستند که نقش حیاتی در حفظ تعادل ردوکس سلولی ایفا می‌کنند. این پروتئین‌ها با کاهش پراکسیدهای سلولی مانند هیدروژن پراکسید، از آسیب‌های اکسیداتیو به DNA، لیپیدها و پروتئین‌ها جلوگیری می‌کنند. پراکسیردوکسین‌ها در انواع موجودات از باکتری‌ها تا انسان یافت می‌شوند و در فرآیندهای مختلفی مانند تکثیر سلولی، آپوپتوز و پاسخ به استرس مشارکت دارند. شش ایزوفرم مختلف از این پروتئین‌ها در انسان شناسایی شده‌اند که هر یک در بخش‌های خاصی از سلول فعالیت می‌کنند. اختلال در عملکرد پراکسیردوکسین‌ها با بیماری‌هایی مانند سرطان، دیابت و بیماری‌های عصبی مرتبط است.
مزایا و کاربردهای کلیدی کیت:
– روش استاندارد و دقیق: مبتنی بر اندازه‌گیری میزان مصرف تیول در طول موج ۴۱۲ نانومتر.
– نمونه‌های قابل استفاده متنوع: این کیت برای اندازه‌گیری فعالیت پراکسیردوکسین‌ها در سرم، پلاسما، ادرار، بافت هموژنزه و لیزات سلولی بهینه‌سازی شده است.
– حساسیت و دقت بالا: با استفاده از فرمول‌های محاسباتی دقیق، امکان اندازه‌گیری فعالیت آنزیم در محدوده نانومول بر دقیقه فراهم شده است.
– قابلیت نرمال‌سازی بر اساس پروتئین تام: امکان بیان نتایج بر حسب nmol/min/mg protein در صورت اندازه‌گیری پروتئین تام.
– طراحی ایرانی، کیفیت جهانی: محصولی از شرکت دانش‌بنیان کارمانیا پارس ژن با استانداردهای بین‌المللی.
کاربردهای بالینی و تحقیقاتی:
– مطالعات سرطان: نقش پراکسیردوکسین‌ها در تومورزایی و مقاومت به درمان.
– بررسی دیابت و عوارض آن: اختلال در عملکرد پراکسیردوکسین‌ها در دیابت مشاهده می‌شود.
– مطالعات بیماری‌های عصبی: مانند آلزایمر و پارکینسون.
– ارزیابی استرس اکسیداتیو و سیستم آنتی‌اکسیدانی: پراکسیردوکسین‌ها از مهم‌ترین آنزیم‌های آنتی‌اکسیدانی سلول هستند.
– تحقیقات پیری و طول عمر: نقش پراکسیردوکسین‌ها در فرآیند پیری.
نمونه‌های قابل استفاده و نحوه آماده‌سازی:
سرم، پلاسما و ادرار: این نمونه‌ها نیازی به رقیق‌سازی ندارند، اما در صورتی که فعالیت PRX در نمونه زیاد باشد، رنگ نهایی کاملاً از دست رفته (جذب کمتر از ۰.۱) و نمونه‌ها شبیه به هم می‌شوند. در این موارد نمونه باید رقیق شود (معمولاً ۱ به ۲).
بافت هموژنزه: ۵۰ میلی‌گرم از بافت را در ۵۰۰ میکرولیتر بافر رقیق کننده (که از قبل در یخچال سرد شده است) کاملاً هموژن کنید (این عمل در دمای سرد انجام شود). سپس با دور ۱۰۰۰۰ RPM به مدت ۱۰ دقیقه سانتریفیوژ کرده و در نهایت مایع رویی را به میزان یک پنجم با بافر رقیق کننده رقیق کرده (مثلاً ۲۰ میکرولیتر نمونه با ۸۰ میکرولیتر بافر رقیق کننده) و سپس در تست استفاده کنید. در صورتی که کاهش رنگ محسوس نباشد، میزان رقت را کاهش دهید (مثلاً ۱ به ۲).
لیزات سلولی: سلول‌ها را ابتدا از محیط جمع‌آوری کرده و با PBS شستشو دهید. سپس در بافر ریپا مخصوص تست‌های استرس اکسیداتیو (قابل تهیه از کارمانیا پارس ژن) با دستگاه سونیکاتور کاملاً لیز کنید. لیزات سلول را سانتریفیوژ کرده و از سوپرناتانت برای تست استفاده کنید. در صورت عدم دسترسی به سونیکاتور، نمونه سلول غوطه‌ور شده در بافر ریپا را به تعداد ۱۰ مرتبه فریز و ذوب کرده و در هر بار به شدت مخلوط کنید
فرمول‌های محاسبه فعالیت پراکسیردوکسین‌ها:
مرحله ۱ – محاسبه نرخ کاهش جذب در دقیقه (ADRPM):
ADRPM = (A Blank – A Test) ÷ t
– A Blank = جذب بلانک نمونه
– A Test = جذب تست PRX
– t = زمان واکنش (۵ دقیقه)
مرحله ۲ – محاسبه نرخ مصرف تیول (TCR):
TCR (µmol/min) = ADRPM × ۰.۰۰۱۰۶۰۵
مرحله ۳ – محاسبه فعالیت آنزیم:
فعالیت آنزیم (nmol/min/mL) = (TCR × ۱۰۰۰) ÷ Vs
– Vs = حجم نمونه (۰.۰۲ میلی‌لیتر)
فرمول نهایی ساده شده:
فعالیت آنزیم (nmol/min/mL) = TCR × ۵۰
نرمال‌سازی بر اساس پروتئین تام:
فعالیت آنزیم (nmol/min/mg) = (TCR × ۱۰۰۰) ÷ غلظت پروتئین (mg)
اطلاعات تماس:
تولیدکننده: کارمانیا پارس ژن
آدرس کارخانه: رفسنجان، ۲۰ کیلومتر جاده رفسنجان به کرمان، منطقه ویژه اقتصادی، ناحیه غذا و دارو
تلفن: ۰۹۱۳۲۹۲۶۱۱۳
ایمیل: Karmaniaparsgene@gmail.com
کلمات کلیدی: کیت اندازه‌گیری پراکسیردوکسین، سنجش فعالیت PRX، آنزیم آنتی‌اکسیدانی، استرس اکسیداتیو، سرطان، دیابت، بیماری‌های عصبی، تعادل ردوکس، کیت تشخیص استرس اکسیداتیو، تجهیزات آزمایشگاهی تشخیصی، کیت ایرانی PRX، Peroxiredoxins Assay Kit