SOD Assay Kit

کیت اندازه‌گیری فعالیت سوپراکسید دیسموتاز (SOD) محصول شرکت کارمانیا پارس ژن، یک کیت تخصصی و دقیق برای سنجش فعالیت آنزیم SOD در انواع نمونه‌های بیولوژیکی است. آنزیم SOD یک آنزیم آنتی‌اکسیدانی کلیدی است که نقش مهمی در محافظت از سلول‌ها در برابر آسیب ناشی از رادیکال‌های آزاد ایفا می‌کند. این آنزیم واکنش تجزیه رادیکال سوپراکسید (O2⁻) را کاتالیز کرده و آن را به مولکول‌های اکسیژن و پراکسید هیدروژن تبدیل می‌کند که سمیت کمتری دارند. اندازه‌گیری فعالیت SOD به عنوان یک بیومارکر معتبر برای ارزیابی سیستم آنتی‌اکسیدانی و استرس اکسیداتیو در بیماری‌هایی مانند بیماری‌های قلبی-عروقی، دیابت، بیماری‌های نورودژنراتیو، سرطان و پیری کاربرد گسترده‌ای در تحقیقات بالینی و پایه دارد.
مزایا و کاربردهای کلیدی کیت:
– روش ساده، سریع و استاندارد: مبتنی بر مهار واکنش رنگ‌زایی با خوانش در طول موج ۴۲۰ نانومتر.
– نمونه‌های قابل استفاده متنوع: این کیت برای اندازه‌گیری فعالیت SOD در سرم، پلاسما، ادرار، بافت هموژنزه و لیزات سلولی بهینه‌سازی شده است.
– حساسیت و دقت بالا: با استفاده از فرمول محاسباتی دقیق، امکان اندازه‌گیری دقیق فعالیت آنزیم فراهم شده است.
– قابلیت نرمال‌سازی بر اساس پروتئین تام: امکان بیان نتایج بر حسب U/µg protein در صورت اندازه‌گیری پروتئین تام.
– طراحی ایرانی، کیفیت جهانی: محصولی از شرکت دانش‌بنیان کارمانیا پارس ژن با استانداردهای بین‌المللی.
کاربردهای بالینی و تحقیقاتی:
– ارزیابی استرس اکسیداتیو در بیماری‌های مزمن: دیابت، بیماری‌های قلبی-عروقی، بیماری‌های کبدی و کلیوی.
– مطالعات بیماری‌های نورودژنراتیو: مانند آلزایمر و پارکینسون.
– پایش پیری و طول عمر: کاهش فعالیت SOD با افزایش سن.
– تحقیقات آنتی‌اکسیدانی: ارزیابی اثربخشی ترکیبات آنتی‌اکسیدان در افزایش فعالیت SOD.
– مطالعات سرطان: نقش SOD در تومورزایی و مقاومت به درمان.
نمونه‌های قابل استفاده و نحوه آماده‌سازی:
سرم، پلاسما و ادرار: این نمونه‌ها نیازی به رقیق‌سازی ندارند.
بافت هموژنزه: ۵۰ میلی‌گرم از بافت را در ۵۰۰ میکرولیتر بافر رقیق کننده نمونه (که از قبل در یخچال سرد شده است) کاملاً هموژن کنید (این عمل در دمای سرد انجام شود). سپس با دور ۵۰۰۰ RPM به مدت ۵ دقیقه سانتریفیوژ کرده و در نهایت مایع رویی را برای انجام تست استفاده کنید.
نکات مهم:
> – در صورتی که در نمونه هیچگونه رنگی مشاهده نشد و یا خیلی کم بود، به دلیل فعالیت زیاد آنزیم در نمونه می‌باشد و بنابراین باید نمونه را با بافر رقیق کننده رقیق نمایید (به طور مثال ۱۰ میکرولیتر نمونه با ۲۰ میکرولیتر بافر رقیق کننده).
> – از سوپرناتانت کشت سلول به دلیل وجود معرف‌های رنگی حساس به pH استفاده نکنید.
لیزات سلولی: سلول‌ها را ابتدا از محیط جمع‌آوری کرده و با PBS شستشو دهید. سپس در بافر ریپا مخصوص تست‌های استرس اکسیداتیو (قابل تهیه از کارمانیا پارس ژن) با دستگاه سونیکاتور کاملاً لیز کنید. لیزات سلول را سانتریفیوژ کرده و از سوپرناتانت برای تست استفاده کنید. در صورت عدم دسترسی به سونیکاتور، نمونه سلول غوطه‌ور شده در بافر ریپا را به تعداد ۱۰ مرتبه فریز و ذوب کرده و در هر بار به شدت مخلوط کنید.
فرمول محاسبه فعالیت SOD:
مرحله ۱ – محاسبه درصد مهار:
درصد مهار = (۱ – (جذب نمونه A2 – جذب نمونه A1) ÷ (جذب استاندارد A2 – جذب استاندارد A1)) × ۱۰۰
– A1 = جذب قبل از افزودن محلول B
– A2 = جذب پس از افزودن محلول B و ۱۰ دقیقه انکوباسیون
مرحله ۲ – محاسبه فعالیت SOD:
فعالیت SOD (U/mL) = درصد مهار × ۰.۴۲
عدد ۰.۴۲ از تقسیم رقت نمونه (۱۰/۲۱۰) بر ۵۰ به دست آمده است.
نرمال‌سازی بر اساس پروتئین تام:
فعالیت SOD (U/µg) = فعالیت SOD (U/mL) ÷ غلظت پروتئین تام (µg/mL)
کنترل کیفی:
میزان جذب استاندارد باید بین ۰.۸ تا ۱.۳ باشد.
اطلاعات تماس:
تولیدکننده: کارمانیا پارس ژن
آدرس کارخانه: رفسنجان، ۲۰ کیلومتر جاده رفسنجان به کرمان، منطقه ویژه اقتصادی، ناحیه غذا و دارو
تلفن: ۰۹۱۳۲۹۲۶۱۱۳
ایمیل: Karmaniaparsgene@gmail.com
کلمات کلیدی: کیت اندازه‌گیری SOD، سوپراکسید دیسموتاز، آنزیم آنتی‌اکسیدانی، استرس اکسیداتیو، بیماری‌های قلبی-عروقی، دیابت، پیری، کیت تشخیص استرس اکسیداتیو، کیت آنتی‌اکسیدان، تجهیزات آزمایشگاهی تشخیصی، کیت ایرانی SOD، Superoxide Dismutase Assay Kit