Acetylcholinesterase Assay Kit

کیت اندازه‌گیری فعالیت استیل‌کولین‌استراز محصول شرکت کارمانیا پارس ژن، یک کیت تخصصی و دقیق برای سنجش فعالیت آنزیم استیل‌کولین‌استراز (AChE) در انواع نمونه‌های بیولوژیکی است. این آنزیم نقش کلیدی در سیستم کولینرژیک داشته و با هیدرولیز استیل‌کولین به کولین و اسید استیک، عملکرد انتقال عصبی را تنظیم می‌کند. سنجش دقیق فعالیت این آنزیم در تشخیص و پایش بیماری‌های عصبی-عضلانی، مسمومیت‌های ناشی از ترکیبات ارگانوفسفره، اختلالات کبدی و مطالعات آنتی‌اکسیدانی کاربرد گسترده‌ای دارد.
مزایا و کاربردهای کلیدی کیت:
– روش ساده و سریع: انجام آزمایش در کمتر از یک ساعت با استفاده از الایزا ریدر در طول موج ۵۶۰ نانومتر.
– نمونه‌های قابل استفاده متنوع: این کیت برای اندازه‌گیری فعالیت آنزیم در خون تام (حاوی ضد انعقاد)، گلبول‌های قرمز شسته‌شده (RBC)، بافت هموژنزه و لیزات سلولی بهینه‌سازی شده است.
– حساسیت و دقت بالا: با استفاده از استانداردهای غلظت‌های مختلف (۱ تا ۱۶ U/mL)، امکان اندازه‌گیری دقیق فعالیت آنزیم در محدوده وسیعی فراهم شده است.
– تشخیص مهارکننده‌ها: امکان محاسبه درصد مهار فعالیت آنزیم با استفاده از فرمول ارائه شده در کیت.
– طراحی ایرانی، کیفیت جهانی: محصولی از شرکت دانش‌بنیان کارمانیا پارس ژن با استانداردهای بین‌المللی.
کاربردهای بالینی و تحقیقاتی:
– تشخیص مسمومیت با ارگانوفسفرها: کاهش فعالیت AChE نشان‌دهنده مسمومیت با آفت‌کش‌ها و عوامل عصبی است.
– پایش بیماری‌های عصبی-عضلانی: مانند میاستنی گراویس و سندرم‌های کولینرژیک.
– بررسی اختلالات کبدی: تغییرات فعالیت این آنزیم در برخی بیماری‌های کبدی قابل مشاهده است.
– مطالعات آنتی‌اکسیدانی و استرس اکسیداتیو: این کیت به عنوان یک ابزار مکمل در تحقیقات مرتبط با اکسیدان‌ها و آنتی‌اکسیدان‌ها استفاده می‌شود.
– تحقیقات علوم اعصاب: بررسی مکانیسم‌های انتقال عصبی و اثر داروهای کولینرژیک.
نمونه‌های قابل استفاده و نحوه آماده‌سازی:
خون تام حاوی ضد انعقاد: به میزان ۱۰ میکرولیتر از خون تام را با ۸ میلی‌لیتر آب مقطر مخلوط کرده و پس از مخلوط کردن شدید، به مدت ۵ دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید.
گلبول‌های قرمز شسته‌شده (RBC): ابتدا ۱ سی‌سی خون را با ۱۰ سی‌سی سرم فیزیولوژی به مدت سه مرتبه شستشو دهید. سپس ۱۰۰ میکرولیتر از خون شسته شده را با ۸ میلی‌لیتر آب مقطر مخلوط کرده و پس از مخلوط کردن شدید، به مدت ۵ دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید. در ادامه خون را به نسبت ۱ به ۴۰ با بافر PBS رقیق کنید.
بافت هموژنزه: ۲۵ میلی‌گرم از بافت را در ۵۰۰ میکرولیتر بافر PBS هموژن کرده و به مدت ۵ دقیقه با دور ۵۰۰۰ RPM سانتریفیوژ کنید. از مایع رویی (سوپرناتانت) برای تست استفاده کنید.
لیزات سلولی: سلول‌ها را ابتدا از محیط جمع‌آوری کرده و با PBS شستشو دهید. سپس در بافر ریپا مخصوص تست‌های استرس اکسیداتیو (قابل تهیه از کارمانیا پارس ژن) با دستگاه سونیکاتور کاملاً لیز کنید. لیزات سلول را سانتریفیوژ کرده و از سوپرناتانت برای تست استفاده کنید. در صورت عدم دسترسی به سونیکاتور، نمونه سلول غوطه‌ور شده در بافر ریپا را به تعداد ۱۰ مرتبه فریز و ذوب کرده و در هر بار به شدت مخلوط کنید.
> نکته مهم: از سوپرناتانت کشت سلول به دلیل وجود معرف‌های رنگی حساس به pH استفاده نکنید.
محدوده نرمال فعالیت آنزیم:
مقادیر نرمال فعالیت استیل‌کولین‌استراز در بافت‌های مختلف با یکدیگر متفاوت است. در گلبول‌های قرمز (RBC)، محدوده نرمال بین ۱ تا ۲ U/mL می‌باشد.
محاسبه درصد مهار فعالیت آنزیم:
در صورت نیاز به محاسبه میزان مهار عملکرد آنزیم، از فرمول زیر استفاده کنید:

درصد مهار = (۱ − (جذب نمونه ÷ جذب کنترل)) × ۱۰۰
– جذب نمونه = جذب نمونه حاوی بازدارنده
– جذب کنترل = جذب نمونه بدون بازدارنده
اطلاعات تماس:
تولیدکننده: کارمانیا پارس ژن
آدرس کارخانه: رفسنجان، ۲۰ کیلومتر جاده رفسنجان به کرمان، منطقه ویژه اقتصادی، ناحیه غذا و دارو
تلفن: ۰۹۱۳۲۹۲۶۱۱۳
ایمیل: Karmaniaparsgene@gmail.com

کلمات کلیدی: کیت اندازه‌گیری استیل‌کولین‌استراز، کیت سنجش AChE، تشخیص مسمومیت ارگانوفسفره، آنزیم کولینرژیک، کیت فعالیت آنزیمی، کیت استرس اکسیداتیو، تجهیزات آزمایشگاهی تشخیصی، کیت ایرانی AChE، Acetylcholinesterase Assay Kit