Tiol Quantification Kit (GSH Assay Kit)

کیت اندازه‌گیری گروه‌های تیول آزاد محصول شرکت کارمانیا پارس ژن، یک کیت تخصصی و دقیق برای سنجش میزان گروه‌های تیول آزاد (سولفیدریل) در انواع نمونه‌های بیولوژیکی است. گروه‌های تیول نقش کلیدی در ساختار و عملکرد پروتئین‌ها و آنزیم‌ها ایفا می‌کنند و اندازه‌گیری دقیق آنها برای درک واکنش‌های بیوشیمیایی، ارزیابی استرس اکسیداتیو و بررسی تغییرات ساختاری مولکول‌ها اهمیت بالایی دارد. گلوتاتیون احیا (GSH) مهم‌ترین تیول غیرپروتئینی در سلول‌ها است که نقش حیاتی در سم‌زدایی، آنتی‌اکسیدانی و حفظ تعادل ردوکس سلولی ایفا می‌کند. کاهش سطح تیول‌های آزاد با بیماری‌هایی مانند دیابت، بیماری‌های کبدی، بیماری‌های قلبی-عروقی، بیماری‌های نورودژنراتیو و پیری در ارتباط است. این کیت بر اساس واکنش تیول‌ها با یک معرف رنگ‌زا طراحی شده که در طول موج ۴۱۲ نانومتر تولید رنگ می‌کند و امکان اندازه‌گیری گروه‌های تیول آزاد را در سرم، پلاسما، ادرار، مایعات بیولوژیکی (مانند بزاق و CSF)، کشت سلول و انواع بافت‌ها فراهم می‌آورد.
مزایا و کاربردهای کلیدی کیت:
– روش ساده، سریع و استاندارد: مبتنی بر واکنش رنگ‌سنجی با خوانش در طول موج ۴۱۲ نانومتر.
– نمونه‌های قابل استفاده متنوع: این کیت برای اندازه‌گیری تیول‌های آزاد در سرم، پلاسما، ادرار، بزاق، مایع مغزی-نخاعی (CSF)، بافت هموژنزه و لیزات سلولی بهینه‌سازی شده است.
– حساسیت و دقت بالا: با استفاده از فرمول محاسباتی دقیق، امکان اندازه‌گیری در محدوده میکرومولار فراهم شده است.
– قابلیت نرمال‌سازی بر اساس پروتئین تام: امکان بیان نتایج بر حسب µm/µg protein در صورت اندازه‌گیری پروتئین تام.
– طراحی ایرانی، کیفیت جهانی: محصولی از شرکت دانش‌بنیان کارمانیا پارس ژن با استانداردهای بین‌المللی.
کاربردهای بالینی و تحقیقاتی:
– ارزیابی استرس اکسیداتیو و سیستم آنتی‌اکسیدانی: کاهش سطح تیول‌های آزاد نشان‌دهنده افزایش استرس اکسیداتیو است.
– بررسی بیماری‌های کبدی: کاهش سطح گلوتاتیون در بیماری‌های کبدی مشاهده می‌شود.
– مطالعات دیابت و عوارض آن: تغییرات سطح تیول‌ها در بیماران دیابتی.
– بررسی بیماری‌های نورودژنراتیو: مانند آلزایمر و پارکینسون.
– تحقیقات آنتی‌اکسیدانی و سم‌زدایی: ارزیابی اثربخشی ترکیبات آنتی‌اکسیدان در افزایش سطح تیول‌ها.
– مطالعات پیری و طول عمر.
نمونه‌های قابل استفاده و نحوه آماده‌سازی:
سرم، پلاسما و ادرار: این نمونه‌ها نیازی به رقیق‌سازی ندارند، اما در صورتی که میزان تیول‌های آزاد در نمونه زیاد باشد، رنگ نهایی زیاد شده (جذب بیشتر از ۱) و داده‌ها قابل اعتماد نخواهند بود. در این موارد نمونه باید رقیق شود (معمولاً ۱ به ۲).
بافت هموژنزه: ۵۰ میلی‌گرم از بافت را در ۵۰۰ میکرولیتر بافر رقیق کننده (که از قبل در یخچال سرد شده است) کاملاً هموژن کنید (این عمل در دمای سرد انجام شود). سپس با دور ۱۰۰۰۰ RPM به مدت ۱۰ دقیقه سانتریفیوژ کرده و در نهایت مایع رویی را به میزان یک پنجم با بافر رقیق کننده رقیق کرده (مثلاً ۲۰ میکرولیتر نمونه با ۸۰ میکرولیتر بافر رقیق کننده) و سپس در تست استفاده کنید. در صورتی که رنگ نهایی محسوس نباشد (جذب کمتر از ۰.۳)، میزان رقت را کاهش دهید.
لیزات سلولی: سلول‌ها را ابتدا از محیط جمع‌آوری کرده و با PBS شستشو دهید. سپس در بافر ریپا مخصوص تست‌های استرس اکسیداتیو (قابل تهیه از کارمانیا پارس ژن) با دستگاه سونیکاتور کاملاً لیز کنید. لیزات سلول را سانتریفیوژ کرده و از سوپرناتانت برای تست استفاده کنید. در صورت عدم دسترسی به سونیکاتور، نمونه سلول غوطه‌ور شده در بافر ریپا را به تعداد ۱۰ مرتبه فریز و ذوب کرده و در هر بار به شدت مخلوط کنید.
> نکته مهم: از سوپرناتانت کشت سلول به دلیل وجود معرف‌های رنگی حساس به pH استفاده نکنید.
فرمول محاسبه غلظت تیول‌ها:
غلظت تیول (µm) = ΔA412 × ۳۵۳.۳۵
– ΔA412 = جذب نمونه – جذب بلانک
عدد ثابت ۳۵۳.۳۵ بر اساس ضریب خاموشی، فاصله نور تا نمونه در پلیت الایزا و رقت نمونه محاسبه شده است.
نرمال‌سازی بر اساس پروتئین تام:
تیول نرمال‌شده (µm/µg) = غلظت تیول (µm) ÷ پروتئین تام (µg/mL)
اطلاعات تماس:
تولیدکننده: کارمانیا پارس ژن
آدرس کارخانه: رفسنجان، ۲۰ کیلومتر جاده رفسنجان به کرمان، منطقه ویژه اقتصادی، ناحیه غذا و دارو
تلفن: ۰۹۱۳۲۹۲۶۱۱۳
ایمیل: Karmaniaparsgene@gmail.com
کلمات کلیدی: کیت اندازه‌گیری تیول، گروه‌های تیول آزاد، گلوتاتیون احیا، GSH، استرس اکسیداتیو، آنتی‌اکسیدان، بیماری‌های کبدی، دیابت، کیت تشخیص استرس اکسیداتیو، تجهیزات آزمایشگاهی تشخیصی، کیت ایرانی تیول، Thiol Assay Kit