(کاتالاز)Catalase Assay Kit

کیت اندازه‌گیری فعالیت کاتالاز محصول شرکت کارمانیا پارس ژن، یک کیت تخصصی و دقیق برای سنجش فعالیت آنزیم کاتالاز در انواع نمونه‌های بیولوژیکی است. کاتالاز یکی از آنزیم‌های کلیدی آنتی‌اکسیدانی است که هیدروژن پراکسید (H₂O₂) سمی را به آب و اکسیژن تجزیه می‌کند و نقش حیاتی در محافظت سلول‌ها در برابر استرس اکسیداتیو ایفا می‌کند. سنجش دقیق فعالیت این آنزیم در تشخیص و پایش بیماری‌های کبدی، کلیوی، اختلالات خونی، مسمومیت‌ها و مطالعات آنتی‌اکسیدانی کاربرد گسترده‌ای دارد.
مزایا و کاربردهای کلیدی کیت:
– روش ساده و سریع: انجام آزمایش با استفاده از الایزا ریدر در طول موج ۵۷۰ نانومتر.
– نمونه‌های قابل استفاده متنوع: این کیت برای اندازه‌گیری فعالیت کاتالاز در سرم، پلاسما، ادرار، بافت هموژنزه و لیزات سلولی بهینه‌سازی شده است.
– حساسیت و دقت بالا: با استفاده از فرمول محاسباتی دقیق و استاندارد داخلی، امکان اندازه‌گیری دقیق فعالیت آنزیم فراهم شده است.
– قابلیت رقت‌سازی هوشمند: کیت به گونه‌ای طراحی شده که در صورت بالا بودن فعالیت آنزیم در نمونه، امکان رقت‌سازی و اندازه‌گیری مجدد وجود دارد.
– طراحی ایرانی، کیفیت جهانی: محصولی از شرکت دانش‌بنیان کارمانیا پارس ژن با استانداردهای بین‌المللی.
کاربردهای بالینی و تحقیقاتی:
– تشخیص و پایش بیماری‌های کبدی: کاهش فعالیت کاتالاز در بیماری‌های کبدی مشاهده می‌شود.
– ارزیابی استرس اکسیداتیو در بیماری‌های مزمن: دیابت، بیماری‌های قلبی-عروقی و نورودژنراتیو.
– پایش مسمومیت‌ها: قرار گرفتن در معرض فلزات سنگین و ترکیبات سمی می‌تواند فعالیت کاتالاز را تغییر دهد.
– مطالعات آنتی‌اکسیدانی: ارزیابی اثربخشی ترکیبات آنتی‌اکسیدان در افزایش فعالیت کاتالاز.
– تحقیقات پیری و طول عمر: کاتالاز یکی از آنزیم‌های کلیدی در مطالعات پیری محسوب می‌شود.
نمونه‌های قابل استفاده و نحوه آماده‌سازی:
سرم، پلاسما و ادرار: این نمونه‌ها نیازی به آماده‌سازی یا رقیق‌سازی ندارند و مستقیماً قابل استفاده هستند.
بافت هموژنزه: ۵۰ میلی‌گرم از بافت را در ۵۰۰ میکرولیتر بافر رقیق کننده (که از قبل در یخچال سرد شده است) کاملاً هموژن کنید (این عمل در دمای سرد انجام شود). سپس با دور ۵۰۰۰ RPM به مدت ۵ دقیقه سانتریفیوژ کرده و از مایع رویی برای تست استفاده کنید.
لیزات سلولی: سلول‌ها را ابتدا از محیط جمع‌آوری کرده و با PBS شستشو دهید. سپس در بافر ریپا مخصوص تست‌های استرس اکسیداتیو (قابل تهیه از کارمانیا پارس ژن) با دستگاه سونیکاتور کاملاً لیز کنید. لیزات سلول را سانتریفیوژ کرده و از سوپرناتانت برای تست استفاده کنید. در صورت عدم دسترسی به سونیکاتور، نمونه سلول غوطه‌ور شده در بافر ریپا را به تعداد ۱۰ مرتبه فریز و ذوب کرده و در هر بار به شدت مخلوط کنید.
> نکات مهم:
> – از سوپرناتانت کشت سلول به دلیل وجود معرف‌های رنگی حساس به pH استفاده نکنید.
> – هر چه فعالیت کاتالاز بیشتر باشد، میزان رنگ ایجاد شده (سبز) کمتر خواهد بود. در صورتی که نمونه‌ها به رنگ نارنجی یکدست درآیند، نشان‌دهنده مصرف کامل محلول C و بالابودن فعالیت کاتالاز است. در این موارد نمونه را حداقل یک دوم رقیق کنید. پیشنهاد می‌شود قبل از انجام تمامی تست‌ها، یک نمونه را در رقت‌های مختلف تست کرده و سپس بقیه نمونه‌ها را در رقت مناسب (با جذب ۰.۵ تا ۱) آماده‌سازی کنید.
فرمول محاسبه فعالیت کاتالاز:
فعالیت کاتالاز بر حسب کیلو واحد بر لیتر (KU/L) از فرمول زیر محاسبه می‌شود:
فعالیت کاتالاز (KU/L) = [S’ – (S – M)] × ۱۲.۲۸۲
– S’ = جذب استاندارد
– S = جذب نمونه
– M =جذب کنترل منفی
> توجه: عدد ۱۲.۲۸۲ حاصل ضرب ضرایب تبدیل حجم‌ها و زمان واکنش است و در فرمول نهایی لحاظ شده است.
نکته درباره کیفیت استاندارد:
میزان جذب استاندارد باید در محدوده ۰.۵ تا ۰.۸ باشد. در صورتی که این عدد کمتر بود، نسبت مخلوط کردن محلول‌های B و C را تغییر دهید. به عنوان مثال اگر جذب استاندارد ۰.۳ باشد، نسبت را به ۱ به ۵۰ تغییر دهید. بنابراین پیشنهاد می‌شود ابتدا یک تست برای استاندارد انجام دهید و پس از تأیید جذب مناسب، تست بر روی نمونه‌ها انجام شود.
اطلاعات تماس:
تولیدکننده: کارمانیا پارس ژن
آدرس کارخانه: رفسنجان، ۲۰ کیلومتر جاده رفسنجان به کرمان، منطقه ویژه اقتصادی، ناحیه غذا و دارو
تلفن: ۰۹۱۳۲۹۲۶۱۱۳
ایمیل: Karmaniaparsgene@gmail.com
کلمات کلیدی: کیت اندازه‌گیری کاتالاز، سنجش فعالیت کاتالاز، آنزیم کاتالاز، استرس اکسیداتیو، آنتی‌اکسیدان، کیت تشخیص بیماری‌های کبدی، کیت آنزیمی، تجهیزات آزمایشگاهی تشخیصی، کیت ایرانی کاتالاز، Catalase Activity Assay Kit