GPX (Glutathion Proxidase Assay Kit)

کیت اندازه‌گیری فعالیت گلوتاتیون پراکسیداز (GPX) محصول شرکت کارمانیا پارس ژن، یک کیت تخصصی و دقیق برای سنجش فعالیت آنزیم GPX در انواع نمونه‌های بیولوژیکی است. آنزیم گلوتاتیون پراکسیداز در سیتوپلاسم و میتوکندری سلول‌ها یافت می‌شود و نقش کلیدی در پیشگیری از آسیب اکسیداتیو ایفا می‌کند. این آنزیم با تبدیل گلوتاتیون احیاشده (GSH) به گلوتاتیون اکسیدشده (GSSG)، از سلول‌ها در برابر پراکسیدها محافظت می‌کند. مقادیر طبیعی این آنزیم می‌تواند در پیشگیری از بیماری‌های مهمی مانند سرطان و بیماری‌های قلبی-عروقی نقش داشته باشد. در این کیت، میزان فعالیت آنزیم GPX در تبدیل GSH به GSSG مورد اندازه‌گیری قرار می‌گیرد و هر چه فعالیت آنزیم بیشتر باشد، محصول نهایی با رنگ کمتری همراه خواهد بود.
مزایا و کاربردهای کلیدی کیت:
– روش استاندارد و دقیق: مبتنی بر اندازه‌گیری جذب نوری در طول موج ۴۱۲ نانومتر.
– نمونه‌های قابل استفاده متنوع: این کیت برای اندازه‌گیری فعالیت GPX در سرم، پلاسما، ادرار، بافت هموژنزه و لیزات سلولی بهینه‌سازی شده است.
– حساسیت و دقت بالا: با استفاده از فرمول محاسباتی دقیق، امکان اندازه‌گیری دقیق فعالیت آنزیم فراهم شده است.
– قابلیت نرمال‌سازی بر اساس پروتئین تام: امکان بیان نتایج بر حسب U/µg protein در صورت اندازه‌گیری پروتئین تام.
– طراحی ایرانی، کیفیت جهانی: محصولی از شرکت دانش‌بنیان کارمانیا پارس ژن با استانداردهای بین‌المللی.
کاربردهای بالینی و تحقیقاتی:
– ارزیابی استرس اکسیداتیو در بیماری‌های مزمن: دیابت، بیماری‌های کبدی، بیماری‌های قلبی-عروقی.
– مطالعات سرطان: نقش GPX در پیشگیری از آسیب اکسیداتیو و تومورزایی.
– پایش بیماری‌های نورودژنراتیو: مانند آلزایمر و پارکینسون.
– تحقیقات آنتی‌اکسیدانی: ارزیابی اثربخشی ترکیبات آنتی‌اکسیدان در افزایش فعالیت GPX.
– بررسی عملکرد سیستم آنتی‌اکسیدانی سلول.
نمونه‌های قابل استفاده و نحوه آماده‌سازی:
سرم، پلاسما و ادرار: این نمونه‌ها نیازی به رقیق‌سازی ندارند، اما در صورتی که فعالیت GPX در نمونه زیاد باشد، رنگ نهایی کاملاً از دست رفته (جذب کمتر از ۰.۳) و نمونه‌ها شبیه به هم می‌شوند. در این موارد نمونه باید رقیق شود (معمولاً ۱ به ۲).
بافت هموژنزه: ۵۰ میلی‌گرم از بافت را در ۵۰۰ میکرولیتر بافر رقیق کننده (که از قبل در یخچال سرد شده است) کاملاً هموژن کنید (این عمل در دمای سرد انجام شود). سپس با دور ۱۰۰۰۰ RPM به مدت ۱۰ دقیقه سانتریفیوژ کرده و در نهایت مایع رویی را به میزان یک پنجم با بافر رقیق کننده رقیق کرده (مثلاً ۲۰ میکرولیتر نمونه با ۸۰ میکرولیتر بافر رقیق کننده) و سپس در تست استفاده کنید. در صورتی که کاهش رنگ محسوس نباشد، میزان رقت را کاهش دهید (مثلاً ۱ به ۲).
لیزات سلولی: سلول‌ها را ابتدا از محیط جمع‌آوری کرده و با PBS شستشو دهید. سپس در بافر ریپا مخصوص تست‌های استرس اکسیداتیو (قابل تهیه از کارمانیا پارس ژن) با دستگاه سونیکاتور کاملاً لیز کنید. لیزات سلول را سانتریفیوژ کرده و از سوپرناتانت برای تست استفاده کنید. در صورت عدم دسترسی به سونیکاتور، نمونه سلول غوطه‌ور شده در بافر ریپا را به تعداد ۱۰ مرتبه فریز و ذوب کرده و در هر بار به شدت مخلوط کنید.
> نکته مهم: از سوپرناتانت کشت سلول به دلیل وجود معرف‌های رنگی حساس به pH استفاده نکنید.
فرمول محاسبه فعالیت GPX:
فعالیت GPX (U/mL) = ΔA412 × ۳۱.۲۵
ΔA412 = A Blank – (A Sample GPX – A Sample blank)
– A Blank = جذب بلانک اصلی
– A Sample GPX = جذب نمونه تست
– A Sample blank = جذب بلانک نمونه
> نکته: با توجه به کاهشی بودن رنگ در نمونه‌های با GPX بیشتر، حتماً میزان جذب بلانک را از میزان جذب نمونه کسر کید و بالعکس عمل نکنید.

نرمال‌سازی بر اساس پروتئین تام: برای نرمال‌سازی داده‌ها، میزان پروتئین تام را اندازه‌گیری کرده و نتایج GPX را بر پروتئین تام تقسیم کرده و داده‌ها را به صورت U/µg گزارش کنید.
اطلاعات تماس:
تولیدکننده: کارمانیا پارس ژن
آدرس کارخانه: رفسنجان، ۲۰ کیلومتر جاده رفسنجان به کرمان، منطقه ویژه اقتصادی، ناحیه غذا و دارو
تلفن: ۰۹۱۳۲۹۲۶۱۱۳ | ۰۳۴۳۴۲۰۸۰۲۵
ایمیل: Karmaniaparsgene@gmail.com
کلمات کلیدی: کیت اندازه‌گیری GPX، گلوتاتیون پراکسیداز، استرس اکسیداتیو، آنتی‌اکسیدان، GSH، GSSG، کیت تشخیص سرطان، بیماری‌های قلبی-عروقی، کیت آنزیمی، کیت آنتی‌اکسیدان، تجهیزات آزمایشگاهی تشخیصی، کیت ایرانی GPX، Glutathione Peroxidase Assay Kit