کیت آمادهسازی سریع DNA برای PCR مستقیم
4.000.000 تومان
| تعداد تست |
100تستی |
|---|---|
| ضمانت ارجاع |
دارد |
| تاریخ انقصا محصول |
1 سال |
کیت KPGxpress DNA Extraction یک روش سریع و کارآمد برای استخراج DNA ژنومی از طیف وسیعی از نمونهها، بدون نیاز به ستونهای تصفیه، شستشوهای متعدد یا حلالهای آلی است. این کیت در کمتر از ۱۵ دقیقه، DNA آماده برای استفاده در واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) را فراهم میکند. عصاره استخراج حاصل مستقیماً به عنوان الگو در واکنش PCR قابل استفاده است و برای کاربردهایی مانند ژنوتایپینگ، غربالگری و شناسایی مولکولی ایدهآل میباشد.
محتویات کیت:
– Solution A (محلول قلیایی – در ظرف پلاستیکی دربسته و دور از ظروف شیشهای نگهداری شود)
موارد مورد نیاز (در کیت موجود نیست):
– میکروتیوب
– سمپلر و سر سمپلر
– دستگاه ترموسایکلر
– مستر میکس PCR
پروتکل استخراج:
۱. ۵۰ میکرولیتر از Solution A را به هر یک از تیوبها اضافه کنید.
۲. نمونه خود را طبق جدول زیر به تیوب اضافه کنید:
نوع نمونه: خون تازه – حجم نمونه: ۱-۵ میکرولیتر
نوع نمونه: خون خشک شده (نقطه خون) – حجم نمونه: یک نقطه به قطر ۳ میلیمتر
نوع نمونه: بافت (هموژن شده) – حجم نمونه: ۱-۲ میکرولیتر
نوع نمونه: سواب – حجم نمونه: یک سواب کوچک
نوع نمونه: کشت باکتریایی – حجم نمونه: ۱-۲ میکرولیتر
نوع نمونه: سایر نمونهها – حجم نمونه: متناسب با نوع نمونه
۳. مخلوط را به خوبی ورتکس کنید.
۴. به مدت ۵-۱۰ دقیقه در دمای ۹۵ درجه سانتیگراد انکوبه کنید.
۵. پس از انکوباسیون، میکروتیوب را به مدت ۱ دقیقه سانتریفیوژ کنید.
۶. از مایع رویی به عنوان الگوی DNA در واکنش PCR استفاده کنید. (توجه: از افزودن بیش از ۲ میکرولیتر از عصاره استخراج به واکنش PCR خودداری کنید، زیرا ممکن است باعث مهار واکنش PCR شود.)
پروتکل پیشنهادی PCR (با مستر میکس KPG 2x PCR):
مرحله: دناتوراسیون اولیه – دما: ۹۴ درجه سانتیگراد – زمان: ۱۵ دقیقه – تعداد سیکل: ۱
مرحله: دناتوراسیون – دما: ۹۴ درجه سانتیگراد – زمان: ۳۰ ثانیه – تعداد سیکل: ۴۰-۴۵
مرحله: اتصال پرایمر – دما: ۵۵-۶۸ درجه سانتیگراد – زمان: ۴۰ ثانیه – تعداد سیکل: ۴۰-۴۵
مرحله: گسترش – دما: ۷۲ درجه سانتیگراد – زمان: ۲-۱۰ دقیقه – تعداد سیکل: ۱
مرحله: گسترش نهایی – دما: ۷۲ درجه سانتیگراد – زمان: ۱۰ دقیقه – تعداد سیکل: ۱
راهنمای عیبیابی:
مشکل: عدم مشاهده باند – علت احتمالی: مقدار ناکافی نمونه اولیه یا مهار واکنش PCR – راه حل: مقدار نمونه اولیه را افزایش دهید. عصاره استخراج را به نسبت ۱:۵ با آب رقیق کنید و ۲ میکرولیتر از آن استفاده نمایید.
مشکل: مشاهده باند ضعیف – علت احتمالی: کیفیت پایین نمونه یا مقدار کم DNA – راه حل: مراحل پروتکل را با دقت بیشتری انجام دهید. از نمونه تازه استفاده نمایید. تعداد سیکلهای PCR را ۳-۵ سیکل افزایش دهید.
شرایط نگهداری:
– Solution A یک محلول قلیایی است. در دمای ۱۵-۲۵ درجه سانتیگراد در ظرف پلاستیکی دربسته و دور از ظروف شیشهای نگهداری شود.
MAECENAS IACULIS
Vestibulum curae torquent diam diam commodo parturient penatibus nunc dui adipiscing convallis bulum parturient suspendisse parturient a.Parturient in parturient scelerisque nibh lectus quam a natoque adipiscing a vestibulum hendrerit et pharetra fames nunc natoque dui.
ADIPISCING CONVALLIS BULUM
- Vestibulum penatibus nunc dui adipiscing convallis bulum parturient suspendisse.
- Abitur parturient praesent lectus quam a natoque adipiscing a vestibulum hendre.
- Diam parturient dictumst parturient scelerisque nibh lectus.
Scelerisque adipiscing bibendum sem vestibulum et in a a a purus lectus faucibus lobortis tincidunt purus lectus nisl class eros.Condimentum a et ullamcorper dictumst mus et tristique elementum nam inceptos hac parturient scelerisque vestibulum amet elit ut volutpat.
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.