محیط کشت DMEM/F12

محیط کشت DMEM/F12 یک محیط کشت سلولی ترکیبی و بسیار غنی است که از مخلوط کردن محیط DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) و محیط F12 (Ham’s F12) به نسبت ۱:۱ تهیه می‌شود. این محیط کشت به دلیل ترکیب منحصربه‌فرد خود، نیازهای تغذیه‌ای طیف وسیعی از سلول‌های پستانداران را در شرایط کشت سرم‌دار یا بدون سرم برآورده می‌کند. DMEM/F12 حاوی غلظت بالایی از اسیدهای آمینه، ویتامین‌ها، گلوکز و سایر مواد مغذی ضروری است و به عنوان یکی از پرکاربردترین محیط‌های کشت در تحقیقات زیست‌شناسی سلولی، مهندسی بافت، و پزشکی بازساختی شناخته می‌شود. این محصول با حجم ۵۰۰ میلی‌لیتر به صورت مایع استریل و آماده مصرف ارائه می‌شود.

ویژگی‌های کلیدی محصول:
– حجم: ۵۰۰ میلی‌لیتر (۱X)
– فرم: مایع استریل فیلتر شده
– نسبت ترکیب: ۵۰ درصد DMEM و ۵۰ درصد Ham’s F12
– سیستم بافر: بیکربنات سدیم (معمولاً ۲.۴ گرم در لیتر)
– گلوکز: ۳.۱۵ گرم در لیتر (معادل ۱۷.۵ میلی‌مولار) – غلظت متوسط (بین ۱ و ۴.۵ گرم در لیتر DMEM)
– ال-گلوتامین: ۳۶۵ میلی‌گرم در لیتر (معادل ۲.۵ میلی‌مولار)
– پیروات سدیم: ۵۵ میلی‌گرم در لیتر (معادل ۰.۵ میلی‌مولار)
– فنل رد: شاخص pH (معمولاً ۸.۱ میلی‌گرم در لیتر)
– pH نهایی: حدود ۷.۲-۷.۴ (با بیکربنات سدیم)
– اسمولالیته: حدود ۲۹۰-۳۱۰ mOsm/kg
– غنی‌ترین محیط کشت تجاری: دارای بالاترین غلظت اسیدهای آمینه، ویتامین‌ها و مواد مغذی
– دمای نگهداری: ۲-۸ درجه سانتی‌گراد، دور از نور
– ماندگاری: ۱۲ ماه از تاریخ تولید

محیط کشت مناسب برای رده‌های سلولی:
– سلول‌های بنیادی جنینی (ESC) و پرتوان القایی (iPSC)
– سلول‌های بنیادی مزانشیمال (MSC)
– سلول‌های اندوتلیال و اپیتلیال
– سلول‌های CHO (Chinese Hamster Ovary)
– سلول‌های سرطانی مختلف (مانند HeLa، HepG2، A549)
– کشت سلول‌های اولیه و رده‌های سلولی حساس

مزایا و کاربردهای تحقیقاتی:
– کشت سلول‌های بنیادی در شرایط بدون سرم یا با سرم کم (به دلیل غنای بالا)
– مهندسی بافت و پزشکی بازساختی (به دلیل وجود مواد مغذی ضروری برای تمایز)
– تحقیقات سرطان و زیست‌شناسی سلولی (به عنوان محیط پایه برای سلول‌های سرطانی)
– مطالعات متابولیسم سلولی و داروسازی
– کاربرد در روش‌های سنجش سمیت سلولی (Cytotoxicity assays)
– مناسب برای کشت سلول‌های حساس به تغییرات اسمولالیته و pH

نکات استفاده و مکمل‌سازی:
– محیط DMEM/F12 فاقد پروتئین، لیپید و فاکتورهای رشد است و برای رشد سلولی نیاز به مکمل‌سازی دارد
– مکمل رایج: سرم جنین گاوی (FBS) با غلظت ۵-۲۰ درصد (بسته به نوع سلول)
– نیاز به محیط CO₂: سیستم بافر بیکربنات سدیم به محیط ۵-۱۰ درصد CO₂ برای حفظ pH فیزیولوژیک نیاز دارد
– افزودنی‌های اختیاری: HEPES (بافر اضافی)، ال-گلوتامین اضافی، و آنتی‌بیوتیک‌ها بر اساس نیاز سلولی
– برای کشت بدون سرم: معمولاً با مکمل‌های اختصاصی مانند B27، N2، ITS (انسولین-ترانسفرین-سلنیوم) و فاکتورهای رشد ترکیب می‌شود

شرایط نگهداری:
– دمای نگهداری: ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد (دمای یخچال)
– محافظت در برابر نور: محیط به نور حساس است، مخصوصاً به دلیل وجود ویتامین‌ها و فنل رد
– حمل و نقل: در دمای محیط قابل حمل است
– تاریخ انقضا: درج شده روی برچسب محصول
– نکته: از یخ‌زدگی محیط جلوگیری کنید و در صورت مشاهده تغییر رنگ (زرد/ارغوانی)، از محیط استفاده نکنید

کلمات کلیدی مرتبط:
محیط کشت DMEM/F12، DMEM F12 500 میلی‌لیتر، محیط کشت سلولی ترکیبی، کشت سلول بنیادی، محیط کشت بدون سرم، Dulbecco’s Modified Eagle Medium، Ham’s F12، محیط مایع استریل، کشت سلول پستانداران، مهندسی بافت، پزشکی بازساختی