آنزیم Lambda Exonuclease | اگزونوکلئاز ۵’→۳’ فرایندگر | غلظت ۲۰ U/µL برای تولید DNA تکرشتهای
4.000.000 تومان
آنزیم Lambda Exonuclease یک اگزودنوکسیریبونوکلئاز بسیار اختصاصی و فرایندگر (Processive) است که به طور انتخابی رشته فسفریله شده ۵’ DNA دوگانه را در جهت ۵’ به ۳’ هضم میکند و منجر به تولید DNA تکرشتهای با انتهای ۳’ میشود. این آنزیم از باکتریوفاژ لایمبدا مشتق شده و در فرآیندهای نوترکیبی و ترمیم DNA نقش اساسی دارد. آنزیم اگزونوکلئاز لایمبدا با غلظت بالا (۲۰ واحد در هر میکرولیتر) در حجم ۲۵۰ میکرولیتر به همراه بافر واکنش ۱۰X (به حجم ۱ میلیلیتر) ارائه میشود و تا ۱۲ ماه در دمای ۲۰- درجه سانتیگراد پایدار است.
ویژگیهای کلیدی آنزیم:
– نوع فعالیت: اگزونوکلئاز ۵’→۳’ با عملکرد فرایندگر (Processive)
– اختصاصی بودن برای بستر: DNA دوگانه با انتهای ۵’ فسفریله را ترجیح میدهد
– فعالیت کم روی بسترهای دیگر: بر روی DNA تکرشتهای و DNA فسفریله نشده فعالیت کمی دارد
– عدم فعالیت: بر روی محلهای نیک (برش) فاقد فعالیت بوده و بر روی محلهای گپ (شکاف) نیز فعالیت محدودی دارد
– محصول نهایی: DNA تکرشتهای (ssDNA) با انتهای ۳’
– کوفاکتور: نیاز به یون منیزیم (Mg²⁺) برای فعالیت
– دمای بهینه فعالیت: ۳۷ درجه سانتیگراد
– غیرفعالسازی حرارتی: ۸۰ درجه سانتیگراد به مدت ۱۰ دقیقه یا ۷۵ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه
– غیرفعالسازی شیمیایی: افزودن ۲ میکرولیتر EDTA 0.5 M
ترکیبات بافر واکنش (۱۰X):
– گلیسین-هیدروکسید پتاسیم (pH 9.4): ۶۷۰ میلیمولار
– MgCl₂: ۲۵ میلیمولار
– تریتون X-100: ۰.۱ درصد (حجمی/حجمی)
– DTT: ۵ میلیمولار
– KCl: ۱.۰ میلیمولار (نمک در غلظت نسبتاً پایین)
شرایط واکنش پیشنهادی:
– حجم مخلوط واکنش: ۵۰ میکرولیتر
– بافر واکنش ۱۰X: ۵ میکرولیتر
– DNA: ۲ میکروگرم
– آنزیم: ۲۰ واحد
– دمای انکوباسیون: ۳۷ درجه سانتیگراد
– زمان انکوباسیون: ۱ تا ۳۰ دقیقه (بسته به میزان هضم مورد نیاز)
– توقف واکنش: افزودن ۲ میکرولیتر EDTA 0.5 M یا حرارت دهی در ۸۰ درجه سانتیگراد به مدت ۱۰ دقیقه
کاربردهای تحقیقاتی:
– تولید DNA تکرشتهای (ssDNA) از قطعات DNA دوگانه برای کاربردهای مختلف
– توالییابی DNA (DNA sequencing)
– تجزیه و تحلیل چندشکلی ژنی با استفاده از تکنیک SSCP
– کلونینگ محصولات PCR
– روش Rolling Circle Amplification (RCA)
– آمادهسازی کتابخانه برای توالییابی نسل بعد (NGS)
تعریف واحد فعالیت آنزیم:
یک واحد از آنزیم، مقدار آنزیمی است که آزادسازی ۱۰ نانومول از محصولات واکنش محلول در اسید را از سوبسترای DNA دورشتهای در مدت ۳۰ دقیقه در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد کاتالیز میکند.
شرایط نگهداری:
– دمای نگهداری: ۲۰- درجه سانتیگراد
– پایداری: تا ۱۲ ماه در دمای ۲۰- درجه سانتیگراد پایدار است
– نکته مهم: از فریز و ذوب کردن مکرر آنزیم خودداری کنید
کلمات کلیدی مرتبط:
آنزیم Lambda Exonuclease، اگزونوکلئاز لایمبدا، λ اگزونوکلئاز، DNA تکرشتهای، تولید ssDNA، آنزیم فرایندگر، اگزونوکلئاز ۵’→۳’، SSCP، Rolling Circle Amplification، کلونینگ PCR، آمادهسازی کتابخانه NGS
MAECENAS IACULIS
Vestibulum curae torquent diam diam commodo parturient penatibus nunc dui adipiscing convallis bulum parturient suspendisse parturient a.Parturient in parturient scelerisque nibh lectus quam a natoque adipiscing a vestibulum hendrerit et pharetra fames nunc natoque dui.
ADIPISCING CONVALLIS BULUM
- Vestibulum penatibus nunc dui adipiscing convallis bulum parturient suspendisse.
- Abitur parturient praesent lectus quam a natoque adipiscing a vestibulum hendre.
- Diam parturient dictumst parturient scelerisque nibh lectus.
Scelerisque adipiscing bibendum sem vestibulum et in a a a purus lectus faucibus lobortis tincidunt purus lectus nisl class eros.Condimentum a et ullamcorper dictumst mus et tristique elementum nam inceptos hac parturient scelerisque vestibulum amet elit ut volutpat.
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.