آنزیم Proteinase K

آنزیم Proteinase K یک سرین پروتئاز با فعالیت گسترده است که از قارچ Tritirachium album استخراج می‌شود. این آنزیم به دلیل توانایی منحصربه‌فرد در تجزیه پروتئین‌ها حتی در حضور مواد دناتوره‌کننده قوی مانند SDS، اوره، یا فنول، به عنوان یک ابزار کلیدی در تحقیقات مولکولی شناخته می‌شود. آنزیم Proteinase K ساخت کارمانیا پارس ژن با غلظت بالا (۲۰ میلی‌گرم بر میلی‌لیتر) در حجم ۱ میلی‌لیتر ارائه می‌شود و با تخریب پروتئین‌های سلولی (مانند هیستون‌ها) و آنزیم‌های مزاحم مانند RNase و DNase، خلوص و پایداری اسیدهای نوکلئیک را تضمین می‌کند. این آنزیم با خلوص بالای ۹۵ درصد (تأیید شده توسط SDS-PAGE)، عاری از فعالیت DNase/RNase، و با سطح اندوتوکسین کمتر از ۰.۱ EU/mg، برای کاربردهای حساس مولکولی ایده‌آل است.
ویژگی‌های کلیدی آنزیم:
– نوع آنزیم: سرین پروتئاز (Serine Protease) با فعالیت گسترده
– منشأ: قارچ Tritirachium album
– غلظت: ۲۰ میلی‌گرم بر میلی‌لیتر
– حجم ارائه: ۱ میلی‌لیتر
– خلوص: بیش از ۹۵ درصد (تأیید شده توسط SDS-PAGE)
– عاری از فعالیت: DNase و RNase
– سطح اندوتوکسین: کمتر از ۰.۱ EU/mg
– فعالیت تضمین شده: هضم ۳۰ درصد کازئین (واحد بر میلی‌گرم)
– محدوده دمایی فعالیت: ۳۷ تا ۶۰ درجه سانتی‌گراد
– محدوده pH فعالیت: گسترده (تا ۱۴)
– سازگاری: فعال در حضور مواد دناتوره‌کننده (SDS، اوره، فنول)
– کوفاکتور: فعالیت در حضور یون کلسیم تقویت می‌شود
– غیرفعال‌سازی حرارتی: ۹۰ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۰ دقیقه
– پایداری: تا ۱۲ ماه در دمای ۲۰- درجه سانتی‌گراد
مراحل آماده‌سازی و استفاده:
– آنزیم Proteinase K تولید کارمانیا پارس ژن آماده به مصرف بوده و نیازی به آماده‌سازی ندارد
– فرآیند پروتئازی: مقدار مشخصی از آنزیم (بین ۰.۱ تا ۱ میلی‌گرم بر میلی‌لیتر) را به نمونه به همراه بافر لیز اضافه کرده و در دمای ۵۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۰ دقیقه انکوبه کنید
– غیرفعال‌سازی: برای غیرفعال‌سازی آنزیم، به مدت ۱۰ دقیقه در دمای ۹۰ درجه سانتی‌گراد انکوبه کنید
کاربردهای تحقیقاتی:
– آماده‌سازی نمونه‌های ژنومی برای استخراج DNA و RNA
– تخریب پروتئین‌ها در بافت‌های تثبیت شده با فرمالین (FFPE)
– حذف آنزیم‌های مزاحم (RNase و DNase) در نمونه‌های بیولوژیکی
– استفاده در پروتکل‌های استخراج اسید نوکلئیک از سلول‌ها و بافت‌ها
– کاربرد در زیست‌شناسی مولکولی، پزشکی قانونی، و تشخیص‌های بالینی
– هیدرولیز پیوندهای پپتیدی در پروتئین‌های آسیب‌دیده یا دناتوره شده
– استفاده در روش‌های وسترن بلات و ایمونوپرسیپیتاسیون
شرایط نگهداری:
– دمای نگهداری: ۲۰- درجه سانتی‌گراد
– پایداری: تا ۱۲ ماه در دمای ۲۰- درجه سانتی‌گراد پایدار است
– نکته مهم: از فریز و ذوب کردن مکرر آنزیم خودداری کنید
کلمات کلیدی مرتبط:
آنزیم Proteinase K، پروتئیناز K، سرین پروتئاز، استخراج DNA، استخراج RNA، تخریب پروتئین، حذف RNase، حذف DNase، خلوص اسید نوکلئیک، بافت FFPE، زیست‌شناسی مولکولی، پزشکی قانونی، تشخیص بالینی