Total Anti-oxidant Capacity (TAC) Assay Kit based on CUPRAC

کیت اندازه‌گیری فعالیت تام آنتی‌اکسیدانی به روش CUPRAC محصول شرکت کارمانیا پارس ژن، یک کیت تخصصی، دقیق و استاندارد برای سنجش ظرفیت آنتی‌اکسیدانی تام (TAC) در انواع نمونه‌های بیولوژیکی، غذایی، دارویی و گیاهی است. روش CUPRAC (Cupric Reducing Antioxidant Capacity) یکی از معتبرترین و پرکاربردترین روش‌های اندازه‌گیری فعالیت آنتی‌اکسیدانی در سراسر جهان است که بر اساس احیای مس (II) به مس (I) توسط آنتی‌اکسیدان‌های موجود در نمونه طراحی شده است. در این روش، ترکیب رنگی با جذب در طول موج ۴۵۰ نانومتر ایجاد می‌شود که شدت آن با قدرت آنتی‌اکسیدانی نمونه رابطه مستقیم دارد. این کیت قابلیت اندازه‌گیری طیف وسیعی از آنتی‌اکسیدان‌ها اعم از محلول در آب و محلول در چربی را دارد و برای ارزیابی استرس اکسیداتیو، کنترل کیفیت مواد غذایی، عصاره‌های گیاهی و مطالعات دارویی کاربرد گسترده‌ای دارد.
مزایا و کاربردهای کلیدی کیت:
– روش استاندارد و معتبر جهانی (CUPRAC): مبتنی بر احیای مس با خوانش در طول موج ۴۵۰ نانومتر.
– نمونه‌های قابل استفاده متنوع: این کیت برای اندازه‌گیری ظرفیت آنتی‌اکسیدانی در سرم، پلاسما، ادرار، بافت هموژنزه، لیزات سلولی، مواد غذایی، عصاره‌های گیاهی و دارویی بهینه‌سازی شده است.
– حساسیت و دقت بالا: با استفاده از استانداردهای غلظت‌های مختلف (۱۵۶.۲۵ تا ۱۰۰۰۰ میکرومول)، امکان اندازه‌گیری دقیق در محدوده وسیعی فراهم شده است.
– قابلیت نرمال‌سازی بر اساس پروتئین تام: امکان بیان نتایج بر حسب nm/µg protein در صورت اندازه‌گیری پروتئین تام.
– طراحی ایرانی، کیفیت جهانی: محصولی از شرکت دانش‌بنیان کارمانیا پارس ژن با استانداردهای بین‌المللی.
اربردهای بالینی و تحقیقاتی:
– ارزیابی استرس اکسیداتیو و ظرفیت آنتی‌اکسیدانی تام در بیماری‌های مزمن: دیابت، بیماری‌های قلبی-عروقی، بیماری‌های کبدی و کلیوی.
– کنترل کیفیت مواد غذایی و نوشیدنی‌ها: اندازه‌گیری آنتی‌اکسیدان‌های موجود در عصاره‌های گیاهی، میوه‌ها و محصولات غذایی.
– تحقیقات دارویی و گیاهی: ارزیابی فعالیت آنتی‌اکسیدانی ترکیبات طبیعی و سنتزی.
– مطالعات پیری و بیماری‌های نورودژنراتیو: نقش آنتی‌اکسیدان‌ها در پیشگیری از آسیب‌های اکسیداتیو.
– پایش درمان در بیماران تحت استرس اکسیداتیو.
نمونه‌های قابل استفاده و نحوه آماده‌سازی:
سرم، پلاسما و ادرار: این نمونه‌ها نیازی به رقیق‌سازی ندارند، اما در صورتی که میزان آنتی‌اکسیدان در نمونه از بیشترین استاندارد کیت هم بالاتر بود، نمونه باید رقیق شود.
بافت هموژنزه: ۲۰۰ میلی‌گرم از بافت را در ۵۰۰ میکرولیتر بافر رقیق کننده (که از قبل در یخچال سرد شده است) کاملاً هموژن کنید (این عمل در دمای سرد انجام شود). سپس با دور ۱۰۰۰۰ RPM به مدت ۱۰ دقیقه سانتریفیوژ کرده و در نهایت مایع رویی را به میزان یک سوم با بافر رقیق کننده رقیق کرده (مثلاً ۲۰۰ میکرولیتر نمونه با ۸۰ میکرولیتر بافر رقیق کننده) و سپس در تست استفاده کنید. در صورتی که رنگ نهایی محسوس نباشد (جذب کمتر از ۰.۲)، میزان رقت را کاهش دهید. بنابراین قبل از انجام تست، حتماً یک نمونه را بررسی کرده و رقت مناسب را به دست آورید.
لیزات سلولی: سلول‌ها را ابتدا از محیط جمع‌آوری کرده و با PBS شستشو دهید. سپس در بافر ریپا مخصوص تست‌های استرس اکسیداتیو (قابل تهیه از کارمانیا پارس ژن) با دستگاه سونیکاتور کاملاً لیز کنید. لیزات سلول را سانتریفیوژ کرده و از سوپرناتانت برای تست استفاده کنید. در صورت عدم دسترسی به سونیکاتور، نمونه سلول غوطه‌ور شده در بافر ریپا را به تعداد ۱۰ مرتبه فریز و ذوب کرده و در هر بار به شدت مخلوط کنید.
> نکته مهم: از سوپرناتانت کشت سلول به دلیل وجود معرف‌های رنگی حساس به pH استفاده نکنید.
محدوده استانداردها:
استانداردهای کیت در غلظت‌های ۱۵۶.۲۵، ۳۱۲.۵، ۶۲۵، ۱۲۵۰، ۲۵۰۰، ۵۰۰۰ و ۱۰۰۰۰ میکرومول بر لیتر تهیه می‌شوند و امکان رسم منحنی استاندارد دقیق را فراهم می‌آورند.
محدوده نرمال:
مقادیر نرمال بسته به نمونه، گونه، جنسیت، شرایط جغرافیایی و محیط شغلی بسیار متغیر خواهد بود، اما به طور معمول با روش به کار رفته در این کیت، در نمونه سرم فرد سالم میزان آنتی‌اکسیدان‌ها در حدود ۱۵۰۰ تا ۸۰۰۰ میکرومول بر لیتر می‌باشد. با این وجود، برای تعیین میزان حد نرمال بایستی تعداد ۱۲۰ فرد سالم مورد ارزیابی قرار بگیرند و میانگین آن به عنوان حد سالم در جمعیت مورد نظر محسوب شود.
فرمول محاسبه نتایج:

پس از خوانش جذب نمونه‌ها، استانداردها و بلانک، با استفاده از منحنی استاندارد، غلظت آنتی‌اکسیدان‌های نمونه به صورت میکرومول بر لیتر (µM/L) محاسبه می‌شود. برای نرمال‌سازی داده‌ها بر اساس پروتئین تام، عدد به دست آمده را بر غلظت پروتئین تام (µg/mL) تقسیم کرده و نتایج را به صورت نانومول بر میکروگرم (nm/µg) گزارش کنید. (پیشنهاد استفاده از کیت اندازه‌گیری پروتئین تام کارمانیا پارس ژن)
اطلاعات تماس:
تولیدکننده: کارمانیا پارس ژن
آدرس کارخانه: رفسنجان، ۲۰ کیلومتر جاده رفسنجان به کرمان، منطقه ویژه اقتصادی، ناحیه غذا و دارو
تلفن: ۰۹۱۳۲۹۲۶۱۱۳
ایمیل: Karmaniaparsgene@gmail.com
کلمات کلیدی: کیت اندازه‌گیری CUPRAC، فعالیت تام آنتی‌اکسیدانی، ظرفیت آنتی‌اکسیدانی، روش CUPRAC، استرس اکسیداتیو، آنتی‌اکسیدان، کنترل کیفیت مواد غذایی، عصاره‌های گیاهی، کیت تشخیص آنتی‌اکسیدانی، تجهیزات آزمایشگاهی، کیت ایرانی CUPRAC، Cupric Reducing Antioxidant Capacity Assay Kit